Acid-rezistență
Acid-rezistența este o proprietate fizică a anumitor bacterii (și mai puțin frecventă la protozoare), constând în special în rezistența la decolorarea cu acizi în timpul procedurilor de colorare.[1][2]
Organismele acid-rezistente sunt ușor de caracterizat folosind tehnici microbiologice standard (de exemplu colorația Gram - dacă un bacil acid-rezistent (BAR) a fost colorat gram, rezultatul ar fi un organism gram pozitiv anormal, care ar indica faptul că testarea suplimentară nu ar fi necesară), deși acestea pot fi colorate folosind coloranți concentrați, în special atunci când procesul de colorare este combinat cu căldură. Odată colorate, aceste organisme rezistă procedurilor de decolorare bazate pe soluții diluate de acid și/sau etanol, comune din multe protocoale de colorare, de aici numele de acid-rezistente.[2]
Conținutul ridicat de acid micolic din pereții celulari ai anumitor Protozoare, și ai celor din Micobacterii, este responsabil pentru modelul de colorare: absorbția slabă, urmată de retenția mare. Cea mai comună tehnică de colorare utilizată pentru a identifica bacterii modificate genetic acid-rezistente este colorația Ziehl-Neelsen, în care mycobacteriile acid-rezistente sunt colorate roșu aprins și constrastează în mod clar pe fundalul albastru. O altă metodă este metoda Kinyoun , în care bacteriile sunt colorate în roșu aprins și se disting clar pe un fond verde. Mycobacteria acid-rezistentă poate fi, de asemenea, vizualizată prin microscopie fluorescentă cu ajutorul unor coloranți fluorescenți (colorația auramine-rodamină, de exemplu).[3] Unele bacterii pot fi, de asemenea, parțial acid-rezistente. Ouăle de paraziți ai viermilor de plămân Paragonimus westermani sunt, de fapt, distruse de colorație, care poate împiedica diagnosticul la pacienții care se prezintă cu simptome asemănătoare tuberculozei.
Unele tehnici de colorare acid-rezistente
modificare- Colorația Ziehl–Neelsen (clasică și modificată - tipuri prin înălbire)[4]
- colorația Kinyoun
- Pentru oamenii cu daltonism (sau pe fundaluri în care detectarea bacteriilor roșii este dificilă) Albastru Victoria poate înlocui carbol fucsina și acidul picric poate fi folosit ca și contracolorație în loc de albastru de metilen, iar tehnica Kinyoun poate fi folosită în rest.[5]
- Colorația Fite[10]
- Colorația Ellis și Zabrowarny[14][15] (fără fenol/acid carbolic)
- Colorația Auramine-rodamine
- Colorația Auramine fenol
Structuri acid-rezistente notabile
modificareFoarte puține structuri sunt acid rezistente; acest lucru face colorarea pentru acid-rezistență deosebit de utilă în diagnostic. Următoarele sunt exemple notabile de structuri care sunt acid rezistente sau acid rezistent modificate:
- Toate Micobacteriile - M. tuberculosis, M. leprae, M. smegmatis și Mycobacterium atipice
- Actinomicete (mai ales unele aerobe) cu acid micolic în peretele celular (de remarcat că Streptomyces NU au); a nu se confunda cu Actinomyces, care sunt genuri non-acid rezistente de Actinomicete
- Nocardia
- Rhodococcus
- Gordonia (Actinomicete)
- Tsukamurella
- Dietzia
- Capul spermatozoidului
- Sporii bacteriilor, vezi Endospore
- Legionella micdadei
- Anumite incluziuni celulare de exemplu
- Incluzii citoplasmatice văzut în
- Neuronii din stratul 5 din cortexul cerebral lipofuscinoza ceroidă neuronală (boala Batten).
- Corpusculi de incluzie nucleari văzuți în
- Intoxicația cu plumb
- Otrăvirea cu bismut.
- Incluzii citoplasmatice văzut în
- Oochisturi ale unor paraziți coccidieni din materiile fecale, cum ar fi:
- Alți câțiva paraziți:
- Sarcocystis
- Ouălele Taeniei saginata se colorează bine, dar ouăle de Taenia solium nu (Poate fi folosită pentru a le distinge)
- Chisturi hidatice, mai ales "cârligele" lor se colorează inconstant cu ZN dar emana o culoare roșie aprinsă în lumină verde fluorescentă , si poate fi de ajutor în detectarea pe fundaluri moderat încărcate, sau cu rare cârlige.[19]
- Formele fungice de drojdie sunt inconstant colorate cu colorații acid rezistente care este considerat un colorant cu spectru îngust pentru ciuperci.[20] Într-un studiu privind acid-rezistența la ciuperci,[21] 60% din blastomyces și 47% din histoplasma au arătat pozitivitate la colorația citoplasmatică a celulelor drojdie-like, iar Cryptococcus și candida nu s-au colorat, și colorare foarte rară a fost văzută în endosporii de Coccidioides.
Referințe
modificare- ^ Madison B (2001).
- ^ a b Ryan KJ; Ray CG (editors) (2004).
- ^ Abe C (2003).
- ^ http://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsacidfast.html
- ^ Theory and Practice of Histological Techniques, John D Bancroft, 6th ed, p314
- ^ Dorner, W. 1926.
- ^ Schaeffer, A. B., and M. Fulton. 1933.
- ^ Endospore Stain Protocol from American Society for Microbiology website Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ http://daignet.de/site-content/die-daig/fachorgan/2007-1/ejomr-2007_8-pdfs/S.356_Hayama.pdf
- ^ stains file entry on Fite Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/fite_faraco_ellis.htm Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ stains file entry on Fite Faraco Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ stains file entry on Wade Fite Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ Ellis, R. C.; Zabrowarny, L. A. (1993).
- ^ http://www.nottingham.ac.uk/pathology/protocols/afb.html Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ Garcia LS, Bruckner DA, Brewer TC, Shimizu RY (July 1983).
- ^ Ng E, Markell EK, Fleming RL, Fried M (September 1984).
- ^ Ortega YR, Sterling CR, Gilman RH, Cama VA, Díaz F (May 1993).
- ^ J Clin Microbiol. 1999 May; 37(5): 1561–1563.
- ^ http://www.dako.com/08066_12may10_webchapter27.pdf Arhivat în , la Wayback Machine.
- ^ Wages ds, Wear dJ. acid-fastness of fungi in blastomycosis and histoplasmosis.
Exemple de protocoale on-line
modificare- Protocolul Ziehl-Neelsen Arhivat în , la Wayback Machine. (format PDF).
- Metoda Ellis & Zabrowarny Arhivat în , la Wayback Machine. alternativă de colorare AR.